Utilización de muestras de leche de tanque para la detección de agentes patógenos en ganado lechero

Ramón Juste es el responsable del Departamento de Sanidad Animal de NEIKER-Tecnalia.

La toma de muestras de leche de tanque es una herramienta sencilla y económica para establecer un diagnóstico a nivel de explotación sobre su estatus sanitario. Además de los propios análisis de calidad de la leche, pueden realizarse pruebas serológicas de detección de anticuerpos en suero lácteo frente a determinados agentes, así como técnicas moleculares para la detección de DNA o RNA de determinadas bacterias o virus. Nuestro grupo ha trabajado en esta línea para el estudio de la distribución de pestivirus (enfermedad de la frontera o border disease) y de la fiebre Q en el ganado ovino lechero del País Vasco. Hemos seleccionado estas dos patologías, por diferentes motivos: border disease por ser, junto con Toxoplasma gondii, una de las principales causas de aborto en nuestra comunidad, y la fiebre Q porque es una zoonosis de importante incidencia en humana, que exige la inmediata puesta en marcha de planes para su control.

Enfermedad de la frontera
El virus border (BDV) es un pestivirus similar al de la diarrea vírica bovina (BVDV). En el mercado existen kits de ELISA para la detección de anticuerpos frente a estos pestivirus (BVDV, BDV) que se aplican en muestras de suero, plasma y leche, y que en función del porcentaje de inhibición (%IHN) clasifica a las explotaciones en positivas a anticuerpos o no, y en las positivas permite estimar el nivel de seroprevalencia en la explotación (<10%, 10-30% y >30%). El estudio serológico llevado a cabo por nuestro grupo en 154 muestras de leche de tanque ovinas, confirmó una alta seroprevalencia frente al BDV, ya que el 68% de las explotaciones tenía anticuerpos, y en concreto el 61% de ellas tenía una seroprevalencia estimada >30%. Además, la aplicación de la técnica de RT-PCR puso de manifiesto que el 9% de las explotaciones eran positivas a la detección de RNA viral, indicando la presencia de animales persistentemente infectados en el rebaño. Con posterioridad, se tomaron un número reducido de sueros en los 3 grupos de edad (corderas >6 meses, primalas y ovejas >2 años) en 34 de estos rebaños, y se comprobó que los resultados serológicos del ELISA en leche de tanque estaban significativamente correlacionados con la seroprevalencia en el rebaño (r=-0.80; P<0.0001). Por lo tanto, la toma de una muestra de leche de tanque y la toma de un número reducido de sueros de los diferentes grupos de edad, incluyendo las corderas >6 meses, para su análisis serológico es una estrategia adecuada para descartar la existencia de infección por pestivirus en los rebaños lecheros. De hecho, esta estrategia se ha empleado ampliamente en el ganado bovino lechero en los países nórdicos, en las campañas de erradicación del BVD.

Fiebre Q
La fiebre Q está causada por la bacteria Coxiella burnetii, de amplia distribución mundial y que afecta a especies domesticas, silvestres y también a la especie humana, ocasionando en esta última cuadros de diversa importancia, con afección pulmonar y/o hepática principalmente. Los rumiantes domésticos se consideran los principales reservorios de la enfermedad, con rutas de transmisión principalmente aerógenas y con escasa o nula importancia de la via alimentaría. Con el fin de mejorar el conocimiento de la distribución del agente de la fiebre Q como base para la investigación de medidas de control, se considero que se podian utilizar las muestras de leche de tanque y los sueros ovinos del estudio anterior. La aplicación de técnias de PCR y ELISA mostró que el 22% de los rebaños fueron positivos a la presencia de DNA de C. burnetii en leche de tanque y que la seroprevalencia era de un 67,6% de las explotaciones (al menos un animal positivo). En realidad, sólo se observaron seroprevalencias superiores al 25% en el 14,7% de los rebaños. Tras esta primera prospección, y una vez verificada la presencia de infección en los rebaños sospechosos, en el momento actual hemos comenzado un plan de control basado en la vacunación (Coxevac, CEVA Salud Animal), tras obtener los permisos oportunos de importación a través de la Agencia Española del Medicamento. Los resultados del efecto de la vacunación en la reducción de la infección estarán disponibles dentro de unos meses.

Utilidad de los análisis en leche de tanque
Como conclusión, la toma de muestras y el análisis de agentes patógenos en leche de tanque de explotaciones lecheras es de gran utilidad para la realización de estudios serológicos y moleculares a gran escala y conocer la distribución de determinados agentes patógenos en rumiantes. Por ello, las asociaciones y cooperativas de profesionales del sector deberían contemplar su utilización en los planes de mejora de la sanidad animal del sector.